Los ácidos biliares son esteroides sintetizados en el hígado y secretados a la vesícula o intestino conjugados con taurina y glicina, conforman; la bilis donde actúan como detergentes a nivel de intestino delgado, disminuyendo la tensión superficial de las grasas y su emulsificación para facilitar la acción de las lipasas, mejorando el drenaje linfático y la protección a infecciones. Son indispensables para la homeostasis del colesterol, la absorción lipídica, excreción y recirculación de medicamentos, vitaminas y toxinas (endógenas y exógenas); en condiciones normales se encuentran en bajas concentraciones en sangre y orina. La reacción mide la oxidación en la posición 3 alfa, común a todos los ácidos biliares: ácido cólico, ácido desoxicólico, ácido litocólico, ácido hiodeoxicólico, ácido quenodesoxicólico y ácido ursodesoxicólico. La determinación de niveles elevados de ácidos biliares totales es indicativo de alteraciones hepatobiliares relacionadas con síntesis, metabolismo y aclaramiento hepático, y alteraciones intestinales en la absorción.